Cervantes: "Sie" ? 'Sie' ? Sie?

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... da ich sie duze, werde ich auf das ein-buchstaben-längere Sie verzichten ...

Mit " " oder mit ' ' oder garnicht?

Solange es kein Zitat ist und auch nicht ironisch gemeint, haben Anführungszeichen da IMHO nichts zu suchen, egal ob einfach oder doppelt oder oben oder unten. Falls du auf eine Hervorhebung hinaus willst, weil das Wort dir ganz besonders wichtig ist, unterstreiche, setze fett oder kursiv.

Anführungszeichen sind bei Begriffsdefinitionen absolut zulässig.